检测试剂盒
产品简介：
1.本试剂盒提供了可用于人类永生化类淋巴母细胞系构建的试剂盒，本试剂盒适用于人类外周血B淋巴细胞永生化细胞株的构建；
2.本试剂盒原理是通过T淋巴细胞抑制剂抑制T细胞的活化和增殖，再利用EB病毒感染B细胞，构建人类永生化类淋巴母细胞系；
3.本试剂盒可以测定25个样本。
包装清单：
保存条件：
P1可置于-80℃冰箱可保存6个月。
P2置于室温，避光保存。
P3可置于-20℃，可保存1年。
注意事项：
1.P1请分装保存，避免反复冻融；
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套进行操作。
使用说明：
1.人外周血PBMC分离：
1）取人外周静脉肝素抗凝血1ml，加入1ml PBS对半稀释；
2）加淋巴细胞分离液（P2）1 ml 于15ml离心管中；
3）利用毛细吸管将稀释好的血液沿管壁徐徐加入分离液试管中，使与分离液形成一界面，两者不能混合；
4）室温条件下，2200 rpm，升速5，降速0，离心23分钟；
5）用毛细吸管小心吸取单个核细胞（PBMC）层，置于新的15ml离心管中，加入5倍以上PBS，1500 rpm×10分钟，洗涤2次；
6）细胞计数。利用1640培养基将细胞浓度调整至2×106/ml，进行计数。
2.EB病毒感染B淋巴细胞
1）取病毒处理液（P1）与1ml人外周血PBMC按照1:1的体积比例进行混合，加入至6孔板的一个孔中进行培养；
2）加入终浓度为20μ/ml的抗IL-2受体链单克隆抗体，置于5% CO2，37℃条件下培养24小时；
3）离心，去除上清，加入2ml 1640培养基继续进行培养，同时加入2ul T淋巴细胞抑制剂（P3）；
4）每3天半量换液。每次换液时同时加入2ul P3溶液；
5）培养两周后，仍为每3天半量换液，但此后不再加入P3溶液，仅加入1640培养基。
3. LCLs的形态学观察
培养1个月后，成功建立LCLs。建系成功的LCLs有两个明显的特征, 淋巴细胞体积增大, 且聚集成团。细胞发生永生化，可无限传代。
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